عقیم سازیسنگ بنای زیست شناسی سلولی و آزمایشات زیست پزشکی است. اکثر آزمایشگاههای زیستپزشکی قادر به انجام هیچ گونه کار مربوط به کشت سلولهای زنده بدون ابزارهای آزمایشگاهی استریل نیستند. در حالی که بسیاری از آزمایشگاهها از رابطه غیررسمی با عقیمی لذت میبرند، بسیار نادر است که تأثیر ابزارهای آزمایشگاهی استریل را دست کم بگیریم. با این وجود، عقیم سازی اغلب به یک کار مهم برای پرسنل آزمایشگاهی سطح ابتدایی تبدیل می شود، مانند تمیز کردن ظروف شیشه ای.
یک فرآیند ضعیف استریلسازی ابزار میتواند منجر به خسارات مالی بیشتر از فقدان کامل امکانات استریلسازی شود. هنگامی که آزمایشگاه ها از تجهیزات استریل شده ضعیف استفاده می کنند، آزمایش ها می توانند به راحتی آلوده شوند و در نتیجه به دلیل نتایج غیرقابل استفاده یا غیرعادی تلفات وارد شود. در برخی موارد، تجهیزات آلوده میتوانند ابزارها یا سختافزارهای دیگر را آلوده کنند، که باعث میشود آزمایشگاه چندین خرابی آزمایشی را تجربه کند که جداسازی و اصلاح آنها دشوار است. اجتناب از این مشکلات استریلیزاسیون ناکافی مستلزم رویکردی دقیق و نتیجهگرا برای مشاهده عقیمسازی است-روشی که بسیاری از آزمایشگاهها میتوانند از آن بهرهمند شوند.
کدام ابزارها باید استریل شوند؟
عقیم سازی برای هر آزمایشگاهی که کار کشت سلولی را انجام می دهد بسیار مهم است، به طوری که اغراق نیست اگر بگوییم همه ابزارهای آزمایشگاهی که در کشت سلولی نقش دارند باید استریل شوند. اکثر آزمایشگاهها سختافزار زیادی دارند و حتی اگر کشت سلولی انجام دهند، مستقیماً در کار کشت سلولی دخالت ندارند. نکته مهم این است که حتی تجهیزاتی که در کشت سلولی نقشی ندارند نیز می توانند از عقیم سازی سود ببرند - با فرض اینکه آزمایشگاه بتواند هزینه استریلیزاسیون را بپردازد.
برای مثال، آزمایشگاههایی که به طور معمول توالییابی ژنتیکی یا PCR را انجام میدهند، ممکن است عقیم کردن پیپتها و سیکلرهای حرارتی لازم برای انجام کار زیستشناسی مولکولی را یک پیشنهاد اقتصادی دشوار بدانند. از آنجایی که این دستگاهها در کشت سلولی دخالت ندارند، عواقب استریل نبودن کاملاً کم است - یا دلیل منطقی این است. مهم این است که این منطق نادرست است.
در حالی که درست است که آلودگی بیولوژیکی روی این ابزارها باعث نمیشود که آزمایشهای کشت سلولی بسیار گرانقیمت پس از قرار گرفتن در معرض میکروارگانیسمهای اشتباه از بین بروند، حتی آزمایشهای خارج از بدن نیز میتوانند نتایج خود را با قرار گرفتن در معرض نادرست با مواد بیولوژیکی خراب کنند.
استریل کردن یک اقدام احتیاطی مهم حتی برای سخت افزارهای آزمایشگاهی است که هرگز مستقیماً در معرض مواد بیولوژیکی قرار نگرفته اند. به عنوان مثال، با ضد عفونی کردن داخل کابینت ایمنی زیستی، یک آزمایشگاه می تواند اطمینان حاصل کند که فضای کاری برای آزمایش های خود به منبع آلودگی تبدیل نمی شود. به همین ترتیب، استریل کردن ظروف شیشه ای تضمین می کند که می توان آن را در مجاورت آزمایش های حساس بدون ترس از خراب شدن نتایج استفاده کرد.
با این حال، همه آزمایشگاهها بودجه لازم برای عقیم کردن هر چیزی که ممکن است مفید باشد را ندارند. عقیم سازی اغلب گران است، بنابراین اکثر آزمایشگاه ها در نهایت به استریل کردن تجهیزات حیاتی اولویت می دهند و در عین حال اجازه می دهند سایر ابزارها دور از ناحیه کشت سلولی غیراستریل شوند. بنابراین، فهرستنویسی منابع استریلسازی عادت خوبی برای توسعه کارکنان آزمایشگاه است، زیرا سختافزاری که بدون استریلسازی قابل استفاده نیست، اگر اکثر تجهیزات دیگر در آزمایشگاه به ترتیب استریل نشده باشند، فایده چندانی ندارند.
آنچه آزمایشگاه ها در طول عقیم سازی ابزار نیاز دارند
فرآیند استریل کردن چندین مرحله مختلف دارد که هر کدام به فضای متفاوتی در آزمایشگاه نیاز دارند. پیچیدگی فضایی فرآیند استریلیزاسیون به این بستگی دارد که آیا آزمایشگاه تحقیقات، کار بالینی یا ساخت را انجام می دهد. کارهای تولیدی و بالینی از استانداردهای استریل بالاتری نسبت به کارهای تحقیقاتی برخوردارند، بنابراین تفکیک و پیچیدگی فضاهای استریلیزاسیون آشکارتر است. به طور خلاصه، سه فضای مورد نیاز برای فرآیند استریلیزاسیون عبارتند از:
منطقه ضد عفونی
منطقه بسته بندی
منطقه عقیم سازی
هر فضا دارای هدف متفاوتی است، مطابق با مرحله فرآیند استریلیزاسیون که مسئولیت مسکن را بر عهده دارد. منطقه ضد عفونی جایی است که اساس عقیم سازی ایجاد می شود و با استفاده از روش های خام مانند تمیز کردن با آب غیر استریل یا مواد شیمیایی پاک کننده، تا حد امکان آلودگی ها را حذف می کند.
از آنجایی که آلودگی زدایی اغلب یک امر درهم و برهم است، اکثر آزمایشگاه ها ترجیح می دهند فضای ضد عفونی خارج از محل کار اصلی آزمایشگاه داشته باشند. هدف از ضد عفونی کردن، حذف تمام آلودگی های قابل مشاهده از ابزار یا تجهیزات در حال استریل کردن است. این می تواند شامل هر چیزی باشد، از توده های خاک گرفته تا مواد شیمیایی تمیزکننده. مهم است که فرآیند بیآلودگی چیزی را که قبل از شروع فرآیند وجود نداشته است، پشت سر نگذارد. بنابراین، اکثر فرآیندهای ضد آلودگی با تمیز کردن تجهیزات با آب به پایان می رسد.
پس از ضد عفونی کردن، آزمایشگاه باید تجهیزاتی را که قرار است ضدعفونی شود بسته بندی کند تا سطوح کاربردی سخت افزار در معرض استریل کننده قرار گیرد اما در معرض هوای بیرون یا هر محیط دیگری که می تواند منجر به آلودگی جدید شود، قرار نگیرد.
به عنوان مثال، برای استفاده از بخار داغ برای استریل کردن داخل بشکه در اتوکلاو، بشکه را با قرار دادن یک تکه فویل آزاد در بالای دهانه بشکه و چسباندن آن به کناره ها "بسته بندی" می کنید. بنابراین هنگام اتوکلاو هنگامی که بخار داغ موجود در استریلیزر سطل را استریل می کند، بخار می تواند در زیر فویل جریان یابد و سطح عملکردی سطل (داخلی که مایع را در خود نگه می دارد) استریل کند و سپس به بیرون سرازیر شود. از آنجایی که فویل به بشکه چسبانده شده است، حتی پس از خارج شدن بشکه از اتوکلاو، سطح کاربردی بشکه در برابر عناصر محافظت شده و استریل باقی می ماند. با این حال، برای آزمایشگاههایی که با مواد بالینی کار میکنند یا مواد دارویی تولید میکنند، استاندارد بستهبندی استریل بسیار فراتر از یک محلول ساده سطلی فویل است.
منطقه عقیم سازی قلب فرآیند عقیم سازی است. بسته به رویکرد آزمایشگاه، منطقه استریلسازی ممکن است از یکی از چندین روش مختلف استریلسازی استفاده کند. این روشها میتواند شامل بخار داغ و فشار، مانند اتوکلاو استاندارد آزمایشگاهی، یا روشهای عجیبتر مانند تابش اشعه گاما باشد. اکثر آزمایشگاه ها به هر روش استریلیزاسیون موجود در تأسیسات خود پایبند هستند، که به معنای استفاده از اتوکلاو در اکثر مواقع است. با این حال، برای آزمایشگاههایی که در ساخت داروها یا دستگاههای پزشکی فعالیت میکنند، پرتودهی رایجتر است.
اعتبار سنجی فرآیند استریلیزاسیون
پس از اتمام عملیات استریلسازی، اکثر آزمایشگاهها یکی از چندین روش را برای تأیید اینکه تجهیزات آنها واقعاً کاملاً استریل شده است و نه فقط تا حدی استریل شده است، دارند. ساده ترین راه برای تأیید این موضوع با نوار اتوکلاو فروتن است. اگرچه نوار اتوکلاو فقط برای تایید استریلیزاسیون در یک اتوکلاو مناسب است، اما به دلیل اینکه وقتی در معرض شرایط استریل کردن برای مدت زمان لازم برای تضمین رنگ کامل استریلیزاسیون قرار میگیرد تغییر میکند، موثر است. بنابراین، بسیاری از آزمایشگاه ها از نوار اتوکلاو به طور گسترده در طول فرآیند استریلیزاسیون استفاده می کنند.
اعتبار سنجی پیچیده تر عقیم سازی به آزمایش های کشت سلولی نیاز دارد. در یک آزمایش تأیید استریلیزاسیون معمولی، نمونه ای از یک کشت باکتریایی زنده از طریق فرآیند استریلیزاسیون مورد استفاده در آزمایشگاه عبور داده می شود و سپس ظرف کشت برای به دست آوردن سلول های زنده، سواب می شود. سپس سواب ها برای چند روز کشت داده می شوند و کلنی های سلولی جدید مشاهده می شوند. اگر هیچ کلنی رشد نکند، فرآیند عقیم سازی موفقیت آمیز است.
ساخت خطوط لوله استریلیزاسیون به نتایج می رسد
قبل از اینکه آزمایشگاه ها بتوانند سخت افزار کشت سلولی مرتبط را با موفقیت استریل کنند، باید منابع مناسب را در محل خود داشته باشند. ردیابی حجم زیادی از معرف ها، پاک کننده ها و مواد یکبار مصرف مورد نیاز برای فرآیند استریلیزاسیون می تواند دشوار باشد، به خصوص برای آزمایشگاه هایی که سابقه طولانی در تکنیک آسپتیک یا تولید استریل ندارند. برای همه چیز، از نوار اتوکلاو گرفته تا محلولهای پاککننده مرحلهی ضدعفونی، کار با یک تامینکننده با تجربه عامل اصلی حمایت از استریلسازی و آزمایش موفق است.
